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昆明小鼠体内寄生虫净化技术研究
作者:管理员    发布于:2016-12-01 11:11:16    文字:【】【】【

  (中南大学湘雅医学院实验动物学部,湖南长沙410078)6:A净化,从血液学、生化学和病理学等方面,对用药动物进行了观察结果表明:吡喹酮不但是一种有效、安全的昆明小鼠多种体内寄生虫净化药物,而且对昆明小鼠没有损害。因此是一种实验小鼠体内寄生虫净化的候选药物之一:昆明小鼠;吡喹酮;药物净化寄生于实验小鼠体内的寄生虫,种类较多,从原虫到蠕虫,据报道有数十种,对实验小鼠的危害也较大有的可以从宿主体内摄取大量的营养物质,造成动物生长发育受阻;有的由于寄生虫产生有关毒素,使动物许多代谢紊乱;有的还可以机械性损伤,引起部分器官组织功能失调;更有的因为寄生虫的感染,改变宿主的生理、生化、免疫反应,对实验研究造成干扰,使许多实验结果的可比性、重复性差,还可能引起人兽共患性疾病。因此,如何净化动物体内寄生虫,清除对动物造成损害,并且不影响动物对实验反应的敏感性,是我们要解决的重要课题本研究试图采用广谱低毒驱虫药物,以达到净化动物群体内寄生虫的目的。

  1材料和方法1试验药物2试验动物采取本单位携带内寄生虫卵阳性普通级昆明实验小鼠32只,雌雄各半,每只体重20~22g,随机分为试验组和对照组3药物净化处理方法将吡喹酮药片碾成粉末,均匀地混合在全价营养饲料中,药物在饲料中的含量为0.04mg/kg,连续用药5d 1.4寄生虫感染率的检查投药期间,逐日对实验组和对照组昆明小鼠进行:2001-08-)3基金项目:湖南省卫生厅资助项目要从事野生动物实验动物化研究工作。

  粪检,采取粪便约5g加生理盐水搅拌,铜网过滤,滤液倒入青霉素小瓶中,将小瓶倒置在载玻片上,沉淀2h后,取载玻片镜检,查出虫卵或虫体持续存活者为阳性小鼠,分别计算实验组和对照组的感染率。

  1.5消化道虫体检查投药5d后,剖检实验组小鼠消化道,按胃、小肠、盲肠和大肠分段检查。于眼观和解剖镜观察虫体。

  6昆明小鼠血液指标以及肝、肾功能的测定将昆明小鼠按摘取眼球法摘除眼球,分别收集抗凝血(肝素钠抗凝)和全血,用日本产F~820血细胞分析仪进行血常规分析,同时从全血中收集血清,测定肝功能(转氨酶)、肾功能(尿素氮)等指标。

  1.7病理学检查取实验组与对照组昆明小鼠各6只(雌雄各半),按常规进行病理解剖检查,并对动物的肝、肾等组织进行病理切片,H.E染色,观察病理改变2结果1昆明小鼠用药后,小鼠精神、食欲排粪、排尿等与对照组无异。连续投药5d均未出现毒性反应2投药后,通过粪检,实验组小鼠内寄生虫感染率逐日降低,至用药后第5d小鼠微小膜壳绦虫转阴率达100(表1),长膜壳绦虫转阴率达100(表2),四翼无刺线虫转阴率达60(表3)2.3剖检结果投药5d后处死实验组全部感染鼠并剖检消化道,己死亡微小膜壳绦虫成虫均寄生于小肠中下段靠近回盲肠部位,与记述一致;小肠中下段部位发现有死亡的长膜壳绦虫成虫;大肠上段和盲肠部检查有己死亡或存活的四翼无刺线虫成虫和大小不一的童虫表1昆明小鼠微小膜壳绦虫感染率的变化组别样本数虫卵阳性数感染率实验组对照组组别样本数表2昆明小鼠长膜壳绦虫感染率(表3昆明小鼠四翼无刺线虫感染率的变化组别样本数虫卵阳性数感染率(试验组对照组有效地消除实验小鼠体内微小膜壳绦虫和长膜壳绦2.4血液指标测定结果(表4)表4血液指标测定血液指标试验组(16)对照组(16)显著性注:ns差异不显著5肝、肾功能的测定(表5)表5肝、肾功能的测定生化指标样本数试验组对照组显著性注:ns差异不显著。

  6病理学检查结果。试验组和对照组动物各6只,以无痛处死法处死,按头、颈胸、腺生殖系统的顺序进行解剖检查,未发现明显的病理变化;取动物的肝、肾、肺组织各一小块,置福尔马林液中固定,切片、H.E染色,均未发现有明显病理变化(炎症、充血梗死水肿等变化)3讨论1吡喹酮是一种广谱的驱虫药,其机理主要是对虫体皮层起损害作用,造成虫体基底层与肌肉分离此外,吡喹酮尚可引起虫体表膜去极化,皮层碱性降低,使葡萄糖的摄取受到抑制,内源性糖原耗竭,吡喹酮还可抑制虫体核酸与蛋白质合成通过上述各种作用,吡喹酮发挥广谱杀虫效应同时它具有低毒副作用小的特点,其副作用为一过性的,无致突变致畸等作用,而且驱虫效果好。目前未见有将其用于实验动物的驱虫报告,本试验的结果可以看出,吡喹酮可以虫,对四翼无刺线虫的转阴率也可达60上述3种内寄生虫是实验小鼠易感染的常见病源,也是我国二级实验小鼠必须排除的肠道寄生虫目前吡喹酮连续5d为一个用药周期,作者正进一步摸索其佳用药剂量及用药周期,以使其达到一个更好的净化效果2为了证实吡喹酮是否对动物具有危害性以及对动物实验的干扰,本试验从血液学生化学、病理学各个方面进行全面检查,发现吡喹酮对动物无明显的副作用,从实验数据分析看,尚未发现数据的异常,经统计学处理证明,并与部分正常生理值比较差异是不明显的,实验组与对照组的差异也不显著报道,使用吡喹酮可引起肝细胞和肾小管上皮细胞轻度浊肿但使用0. 04mg/kg这一极小剂量时,未见有这些变化,因此,在一定剂量内用药,使用吡喹酮是安全的。

  3虽然用这种方法可以对实验动物进行药物寄生虫净化,并作为清洁级实验动物体内寄生虫净化的措施之一,但其他措施也需配套,例如饲料、垫料等物品的消毒处理等。

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